Agosto 05, 2021

    TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA COVID19 (SARS-COV-2)

    En la pandemia actual hemos ido conociendo diferentes formas de buscar el virus causante de la infección llamada COVID19.

    En microbiología se utilizan dos formas de detección del virus:

    1.Métodos directos: DETECCION DIRECTA DEL VIRUS. Las técnicas utilizadas son: PCR, test de Antígeno por quimioluminiscencia y Test rápido de antígeno.

    2.Métodos indirectos: A través de la respuesta inmunitaria del paciente, en este caso serán los ANTICUERPOS. Las técnicas utilizadas son: Test rápido de anticuerpos, test ELISA, Test de Ac. Por quimioluminiscencia

    Si ya ha pasado el virus es recomendable hacer un análisis y ver las consecuencias del mismo.

    Detección directa del virus                                          

    Inmunocromatografía TEST RAPIDOS DE ANTIGENO: Se utilizan reactivos con unas sustancias análogas a los anticuerpos que se adhieren a las proteínas del virus a detectar. No suelen ser 100% específicos ni 100% sensibles, pero pueden servir para hacer un primer screening rápido en un estudio de una epidemia por virus, como ocurre actualmente con el SARS-COV-2.  La ventaja es que es una técnica de fácil manejo, no se requiere instrumental sofisticado, y es muy rápida, pues utiliza unas bandas similares a lo que conocemos como un test de embarazo. MUY UTIL DESDE EL PRIMER DIA DE LOS SINTOMAS Y HASTA DESPUES DE 7 DÍAS. Distingue la infección de las causadas por otros virus de la gripe, aunque aún se está valorando la posibilidad de algunas reacciones cruzadas con otros virus que podrían estar dando lugar a los llamados falsos positivos.

    PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): Es una técnica de la biología molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis.. Con esta técnica podemos saber si hay o no material genético viral, incluso podemos llegar a medir la carga viral y por tanto saber si hay más o menos probabilidades de que se convierta en un cuadro infeccioso agudo o bien sean restos de una infección anterior. La PCR puede detectar virus "infectivo" o también restos de virus "muertos" de una infección pasada meses antes, por lo que no siempre la presencia positiva del virus va a desencadenar o relacionarse con un cuadro infeccioso. UTIL DESDE EL TERCER DIA DE CONTACTO O INFECCIÓN POR EL VIRUS, HASTA aproximadamente EL DÍA 10 DE LOS SINTOMAS.

    Quimioluminiscencia: Es otra forma de DETECCION DIRECTA DE ANTÍGENO SIMILAR A LA PCR en sensibilidad y especificidad. Pero más económico y rápido. Se mide en exudado nasofaríngeo, nasal y pronto se podrá medir en saliva.

    Detección indirecta del virus: ANTICUERPOS

    Inmunocromatografía: Esta técnica es muy similar a la descrita anteriormente con la detección de los antígenos. Poca sensibilidad y poca especificidad. En este caso se buscan los anticuerpos (Ac) específicos contra el virus. Es el que llamamos también “TEST RAPIDO”. Sólo es UTIL a partir del 7º días de los síntomas. Puede dar falsos negativos y falsos positivos con frecuencia.

    ELISA (Enzimoinmunoanálisis de adsorción): Es una de las técnicas más usadas en los laboratorios.. Normalmente se miden anticuerpos IgA, IgM e IgG. Su medición de forma aislada nos da una idea de la evolución de la enfermedad en el tiempo, después de varios análisis y su comparación. Si bien en casos de infección muy reciente o muy antigua, el pequeño nivel de anticuerpos no siempre se detecta bien por esta técnica. Cabe destacar que la mayoría de los ELISAs para SARS-COV-2 están detectando Ac anti-proteína N y S del virus, por lo que la especificidad de este método es siempre menor al 100%.

    Quimioluminescencia (CLIA): El tipo de análisis es similar al anterior pero aquí hay cambio de luz. La alta detectabilidad y gran estabilidad de los reactivos quimioluminiscentes ha permitido importantes mejoras en el rendimiento analítico de los inmunoanálisis. Realmente se ha convertido en unas de las técnicas de inmunoanálisis más sensible y precisa.

    En el caso del coronavirus nuestro laboratorio utiliza los reactivos de Ortho Clinical Diagnostics, y ha desarrollado dos tipos de mediciones:

    - Se pueden medir anticuerpos totales (IgM+IgA+IgG), permitiendo detectar si ha habido contacto con el virus con muy alta sensibilidad. De hecho, esta medición es la más sensible y específica del mercado, ya que su capacidad de detectar anticuerpos en pequeñas cantidades es muy potente y, además, busca anticuerpos sólo sobre la proteína Spike 1.

    - O bien se puede medir IgG de forma aislada para valorar la evolución. Nos permite saber el grado de inmunización del paciente, o si está en fase aguda o en fase de desaparición de los anticuerpos por infección pasada. Nuestro análisis ya puede ofrecer valores de tasas de concentración de anticuerpos, que de cara a la vacunación, serán de elección para comprobar la eficacia de la vacuna.

    Para entender mejor el interés de las mediciones de los distintos anticuerpos, pongo a continuación una gráfica donde podemos ver la evolución de éstos desde la fase inicial de contacto con el virus. No todos los virus funcionan igual, pero aproximadamente la respuesta inmunitaria de anticuerpos suele ser similar a la mayoría de microorganismos (Figura 1).

    En la gráfica, de izquierda a derecha, se observan unos 14 días de incubación o fase asintomática (depende de cada individuo, este periodo puede variar). Después se observa una subida y bajada rápida de IgA e IgM que dura unos 22 a 28 días aproximadamente. La respuesta inmunitaria es individual de cada persona, y en función de la cantidad de virus que invadan al paciente y su capacidad de respuesta, así será la cantidad y duración de anticuerpos en el tiempo.

    Después de tantos meses y tantos test. Mi experiencia es la siguiente:

    Contacto con una persona  infectada hace 3 días o más antes de síntomas: Lo mejor en este caso sería realizar una PCR o Antígeno por Quimioluminiscencia.

    Primer día de síntomas: Se puede usar: Test rápido de Antígeno, Test de antígeno por quimioluminiscencia o  PCR.

    Después de 4 días de síntomas: Test rápido de Antígeno, Test de antígeno por quimioluminiscencia, PCR o ya se pueden medir ANTICUERPOS TOTALES por nuestra técnica 100% sensible y 100% específica.

    A partir de 7 días de síntomas: es de elección medir anticuerpos totales y la IgG, por quimioluminescencia o bien hacer una medición de anticuerpos por ELISA, IgM e IgG sabiendo las características antes mencionadas anteriormente.

    Si se desea saber si estuvo en contacto con el virus. La técnica de elección sigue siendo la quimioluminiscencia de anticuerpos totales, porque en los casos iniciales de la infección, es capaz de hacer una medición con muy pocos anticuerpos, incluso antes de que se pudiera medir la IgM. Y en el caso de haber pasado la enfermedad hace meses cuando los anticuerpos no se detectan por otras técnicas, al ir desapareciendo de sangre periférica, la medición de anticuerpos totales sería la ideal para poder dejar constancia de que hubo conta

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    Nuestro laboratorio ESTUDIOS ANALITICOS APLICADOS A LA CLINICA se encuentra en Boadilla del Monte, Avda. del Nuevo Mundo 11. 28660 Madrid. Esta dirección de correo electrónico está siendo protegida contra los robots de spam. Necesita tener JavaScript habilitado para poder verlo., tel 916334223.

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